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赛默飞色谱柱频繁损坏预防措施

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浏览:- 发布日期:2021-10-08 10:34:13【

1、在赛默飞色谱柱液相系统中加入在线过滤器

 在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米,对于UHPLC会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。所以,在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物,以防止柱头过滤筛板的堵塞。注意:但是对于非常低死体积的液相系统,在线过滤器的加入可能会导致系统死体积增大峰展宽变严重的问题。而对于大多数的液相系统而言,色谱图不会有太大变化。

赛默飞色谱柱使用注意事项(1)

 2、在赛默飞色谱柱前端使用保护柱

 保护柱有很多种,通用型、一体式、卡套式,但是它其实是一个和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因为它具有和分析柱相同的内部填料,所以保护柱不仅可以阻隔颗粒物,还可以阻隔易吸附的样品基质组分。注意:由于保护柱中可能有大量的强保留组分,在用强溶剂清洗系统时请取下保护柱,以防止这些强保留组分被洗脱进分析柱。保护柱如果出现吸附饱和也可能会对分离效果有影响。

 3、对样品进行净化处理

 有一些液相的分析方法没有明确标注样品的净化,但我希望大家在做分析时都能够考虑样品的净化,常用的方案是对样品进行过滤。在实际工作中,赛默飞色谱柱的储存也会影响柱子的使用寿命。

 4、赛默飞色谱柱使用时注意事项:

 为避免管路中的有机溶剂和气泡进入色谱柱,先用水冲洗整个色谱系统,然后才能接入凝胶柱。不要让有机溶剂进入柱中,否则会使填料脱水,导致柱床损坏,要小流速开启泵,不要快速加大流速,以防止压力迅猛升高而导致柱床损坏。15mm的柱子流速不要超过3ml/min。每次使用后务必用蒸馏水冲洗干净将含盐的流动相置换干净,若较长时间不用请按保存方法保存。

 5、赛默飞色谱柱保存方法:

 将凝胶柱用蒸馏水冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠水溶液封存,或三氯丁醇苯基汞代盐将色谱柱封闭后低温保存(温度在5℃左右)在冰箱。再次使用时,用蒸馏水将保护溶液冲洗掉即可使用。如果次日还要使用也要从系统中取下,将赛默飞色谱柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。

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